尊龙凯时推出的人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA试剂盒,专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先涂覆了adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加样本、标准品和HRP标记的检测抗体,随后进行温育并彻底洗涤。底物TMB在酶的催化下会转化成蓝色,随后在酸性环境中变为最终的黄色。颜色的深浅与样本中adropin(AD)的浓度成正相关。最终,通过酶标仪在450nm波长下测量吸光度(OD值),便可计算样品浓度。
试剂盒组成
本试剂盒包括以下组件:
- 微孔酶标板
- 标准品(浓度依次为0、25、50、100、200、400 pg/mL)
- 样本稀释液
- HRP标记的检测抗体
- 冲洗缓冲液
- 底物A和底物B
- 终止液
- 封板膜
- 说明书
样品收集与处理
为确保检测结果的准确性,样品收集与处理方法如下:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,收集血液后以3000转离心10分钟分离血清与红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
- 细胞上清液:以3000转离心10分钟去除颗粒与聚合物。
- 组织匀浆:将组织与适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
- 保存:若未及时检测样本,按一次用量分装,存放于-20℃,避免反复冻融。
注意事项
在操作过程中应遵循以下注意事项:
- 试剂盒从冷藏取出后应在室温平衡15-30分钟后使用。
- 使用加样器加样,并定期校对其准确性,避免实验误差。
- 每次测定同时应记录标准曲线,进行复孔实验。
- 确保封板膜只用于一次性,以避免交叉污染。
- 所有样本和废弃物应按传染性物质处理。
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